【pbs缓冲液作用】细胞试验pbs缓冲液作用_生物_阿瑟6107
编辑： admin 2017-15-06
- 追问：
那为什么要两次？
互助这道作业题的同学还参与了下面的作业题
题1： pbs缓冲液的性质和用途请问pbs缓冲液的性质和用途是什么,ph6.5的缓冲液,四种物质的百分比是多少,或者每种的浓度是多少谢谢
作用是等渗、平衡渗透压、维持离子强度和PH
NaCl8g/L
KCl 0.2g/L
Na2HPO4 1.15g/L
KH2PO4 0.2g/L
题2： 请问PBS缓冲液如何配?我现在需要做实验用到PBS液,但我不了解详细的各种试剂所需加入的确切的量,望哪位前辈告之,[生物科目]
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g,KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用.
PBS－T缓冲液
含0.05%吐温－20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS－T)
PBS-T缓冲液
取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用.现用现配.
PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果.
PH 7.6 7.4 7.2 7.0
H2O 1000 1000 1000 1000
NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5
Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2
NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4
题3： 求用于细胞培养的PBS缓冲液的配方以及保存方式.[化学科目]
PBS 1L配方pH7.4：
磷酸二氢钾(KH2PO4)：0.27g
磷酸氢二钠(Na2HPO4)：1.42g
氯化钠(NaCl)：8g
氯化钾(KCl)0.2g
加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L.
高温高压灭菌后室温保存.
题4： 为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子?在将培养皿中的细胞吹下之前,需要将培养液倒掉,然后用不含钙离子和镁离子的PBS洗,才能加Trypsin,为什么必须是不含金属离子的PBS?原理是什[生物科目]
因为：PBS中加入了Na2HPO4和0.24g KH2PO4,他们能与钙离子和镁离子,金属离子结合生成沉淀,
附：
0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟）,保存存于室温或4℃冰箱中.
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.
题5： pbs缓冲液加吐温20的作用
洗脱非特异性吸附
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4
首先它是一种缓冲液,能保持组织细胞需要的PH范围.第二,其中所含的盐浓度与体内环境的相似,对组织细胞没有毒性作用.用PBS洗细胞就是去掉培养基及其中所含的影响实验结果的成分.PBS对试验结果没有影响.当然对细胞也无毒害.
其他同学给出的参考思路：
维持PH平衡吧